بیان ژن پروتئین پوششی ویروس ایرانی پیچیدگی برگ چغندرقند(bctiv) در باکتریescherichia coli

چکیده ویروس ایرانی پیچیدگی برگ چغندرقند (bctiv) جدید ترین عضو جنس کرتوویروس است که اخیرا از ایران گزارش شده است. به منظور ردیابی و شناسایی این ویروس در طبیعت، از روش های سرولوژیکی مبتنی برواکنش آنتی بادی-آنتی ژن و روش های مولکولی استفاده می شود. تحقیق حاضر با هدف تسهیل فرآیند شناسایی سرولوژیکی ویروس با استفاده از تولید آنتی بادی نوترکیب، پایه ریزی شد. بدین منظور، در ابتدا ژن پروتئین پوششی ویروس در ناقل بیان پروکاریوتی (pqe60) همسانه سازی گردید. سپس پلاسمید نوترکیب بدست آمده به باکتری e. coliسویه m15، منتقل شد. در مرحله بعد پس از القای بیان، پروتئین مورد نظر استخراج شد و با تکنیک sds-page در ژل پلی اکریل آمید 5/12% مورد بررسی قرار گرفت. پس از رنگ آمیزی ژل، پروتئین بیان شده با اندازه قابل انتظار مشاهده گردید. بر این اساس، وزن مولکولی پروتئین پوششی با استفاده از نرم افزار آنلاین expasy برابر 73/29 کیلو دالتون محاسبه گردید که با وزن مولکولی نوار مشاهده شده در آزمون sds-page نیز مطابقت داشت. از این پروتئین می توان در آینده جهت تولید آنتی بادی در کیت های تشخیص سرولوژیکی ویروس استفاده نمود. کلمات کلیدی: ویروس ایرانی پیچیدگی برگ چغندرقند، پروتئین پوششی، بیان، سیستم پروکاریوتی.